人表皮癌细胞A-431在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤，在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。这是一个超三倍体人细胞株。
人表皮癌细胞A-431操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5%CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
人表皮癌细胞A-431培养方法如下：
1、将细胞稀释到1000个细胞/mL，接种到24孔板，每孔1ml。
2、接种后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。
3、每隔3天跟换1次培养液，保持G418浓度不变。
4、选择出在10~14天内使全部死亡的G418浓度来进行下一步的筛选试验。由于每种细胞对G418的敏感性不同，一般变动在100ug/ml～1000ug/ml范围。
